Toepassing van chromogene techniek op bacteriële endotoxinentest

Chromogene techniek is een van de drie technieken die ook gelstollingstechniek en turbidimetrische techniek omvatten om endotoxinen van gramnegatieve bacteriën te detecteren of te kwantificeren door gebruik te maken van amoebocytlysaat geëxtraheerd uit het blauwe bloed van de degenkrab (Limulus polyphemus of Tachypleus tridentatus).Het zou kunnen worden geclassificeerd als een eindpunt-chromogene test of een kinetisch-chromogene test op basis van het specifieke gebruikte testprincipe.

Het reactieprincipe is dat: het amebocytlysaat een cascade van serineprotease-enzymen (pro-enzymen) bevat die kunnen worden geactiveerd door bacteriële endotoxinen.Endotoxinen activeren de pro-enzymen om geactiveerde enzymen te produceren (genaamd coagulase), de laatste katalyseert de splitsing van het kleurloze substraat, waardoor een geelgekleurd product pNA vrijkomt.Het vrijgekomen pNA kan fotometrisch worden gemeten bij 405 nm.En als de absorptie positief gecorreleerd is met de endotoxineconcentratie, kan de endotoxineconcentratie dienovereenkomstig worden gekwantificeerd.


Posttijd: 29 september 2019